Mira DNA -isotermisk hurtig amplifikationssæt anvender avanceret nukleinsyreramplifikationsteknologi ved både stuetemperatur og en konstant temperatur (typisk 39ºC til 42ºC). Med hjælp fra hjælpeproteiner og enkeltstrengbindende proteiner danner rekombinase og primere et kompleks, der søger efter og binder til målhomologidomænet. Dette resulterer i dannelsen af en D-loop-region på det homologe sted, der indledte Strand Exchange. Når rekombinase dissocieres fra komplekset, binder polymerasen sig til den 3 'ende af primeren, der begynder kædeforlængelsesprocessen. Ved at udnytte eksonukleaseaktiviteten bruger kittet desuden specifikke molekylære sonder designet til skabelonen, hvilket muliggør realtidsovervågning af målfragmentforstærkningsprocessen via fluorescensdetekteringsudstyr..
【Funktioner】
Høj følsomhed
Sættet giver enestående følsomhed og specificitet for nukleinsyreforstærkning.
Hurtig reaktionstid
Forstærkningsprocessen tager kun 20 minutter og giver hurtige resultater.
Praktisk opbevaring og håndtering
Reaktionskomponenterne er i tørt pulverform, let at opbevare og håndtere.
Bred kompatibilitet
Kompatible med forskellige fluorescens -kvantitative PCR -instrumenter, konstant temperaturfluorescensamplifikationssystemer.
【Primerdesign】
For optimal ydelse skal primere være 30-35 bp i længden. Korte primere kan reducere amplifikationshastigheden og detektionsfølsomheden. Primerdesign bør undgå sekundære strukturer, der kan hindre forstærkning. Den anbefalede ampliconlængde er 150-300 bp.
【Fluorescerende sonde -design】
Den fluorescerende sonde bør ikke overlappe det med det specifikke primergenkendelsessted. Det skal være 46-52 nt i længde, undgå palindromiske sekvenser, interne sekundære strukturer og kontinuerlige gentagne baser. Probe -designet inkluderer fire modifikationssteder:
- A DSpacer(Tetrahydrofuran, THF) ved cirka 30-35 nt fra 5 'enden, der fungerer som et genkendelsessted for exonuclease.
- A Fluorescerende gruppeer mærket opstrøms for THF -stedet.
- A Quenching Grouper placeret nedstrøms, 2-4 nt bortset fra den fluorescerende gruppe.
- Den 3 'ende af sonden er mærket med enBlokeringsgruppe(f.eks. En amingruppe, phosphatgruppe eller c 3- afstand), med THF ca. 15 nt væk fra 3 'enden.
【Kitkomposition】
|
Ckomposition |
COntent |
|
En buffer |
1,6 ml × 1Tube |
|
B -puffer |
150 μl × 1Tube |
|
POsitive kontrolskabelon |
100 μl × 1Tube |
|
POsitive kontrolsonde ogPrimer MIx |
70 μl × 1Tube |
|
Reagens |
48T |
|
Vejledningsvejledning |
1Kopi |
【Pakning af specifikationer】
- Specifikationer: 48 t/pakke
Populære tags: Mira DNA isotermisk hurtig amplifikationssæt fluorescens, Kina Mira DNA isotermisk hurtig amplifikationssæt fluorescensproducenter, leverandører
