Spredning af karantænepatogener udgør en betydelig risiko for den globale afgrødeproduktion, truer afgrødesundheden og forstyrrer agroøkosystemer. Rettidig og nøjagtig registrering på-webstedet er afgørende for at forhindre udbrud. Rekombinase polymerase amplifikation (RPA) og multikomponent DNAzyme (MNAzyme) er lovende isotermiske detektionsteknologier; deres integration er imidlertid blevet hindret af kravet om enkelt-strenget DNA (ssDNA) til MNAzyme-aktivering, da RPA genererer dobbelt-strenget DNA (dsDNA). For at løse dette har vi udviklet OAR-MNA-biosensoren, en innovativ one-pot-platform, der kobler asymmetrisk RPA (aRPA) med MNAzyme--assisteret målgenanvendelse. Biosensoren blev anvendt til at detektere Acidovorax citrulli, det forårsagende middel til bakteriel frugtklat (BFB) i cucurbits. Ved at justere RPA-primerkoncentrationer genererer aRPA rigeligt ssDNA, hvilket muliggør visuel påvisning af A. citrulli med en detektionsgrænse på 20 kopier/μL og perfekt specificitet, hvilket overgår ydeevnen af fluorescerende RPA. Biosensoren demonstrerede 100 % overensstemmelse med qPCR i frøprøver og opretholdt robust ydeevne i spiked melon homogenat. Vores komparative analyse afslørede fordelene ved OAR-MNA-systemet, herunder reducerede detektionsomkostninger og forbedret feltanvendelse. Når biosensoren er koblet sammen med en bærbar DNA-analysator, giver den brugervenlige-resultater (+/−), hvilket gør den ideel til-implementering på stedet. Ud over BFB
detektion, er OAR-MNA med succes blevet anvendt til påvisning af Cucumber Green Mortle Mosaic Virus (CGMMV), et RNA-karantænepatogen, der forårsager alvorlige tab af agurkeafgrødeproduktion. Ved at muliggøre tidlig, nøjagtig-diagnose på stedet repræsenterer OAR-MNA-biosensoren et fremskridt inden for plantepatogendetektionsteknologi, der tilbyder et lovende værktøj til sikring af global afgrødeproduktion.
